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刘保福 主治医师
威县常屯卫生院
一级甲等
妇产科
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巢式 PCR 是一种特殊的聚合酶链式反应技术,具有高特异性和高灵敏度等特点。与普通 PCR 相比,在原理、操作流程、应用范围、优缺点等方面存在差异。 1. 原理:巢式 PCR 采用两对引物进行两轮扩增,而普通 PCR 通常只用一对引物。 2. 操作流程:巢式 PCR 第一轮扩增产物作为第二轮扩增的模板,普通 PCR 则直接对原始模板进行扩增。 3. 应用范围:巢式 PCR 常用于检测微量病原体、稀有突变等,普通 PCR 应用于常规基因检测。 4. 特异性:巢式 PCR 特异性更高,能有效减少非特异性扩增。 5. 灵敏度:巢式 PCR 灵敏度优于普通 PCR,可检测更低浓度的目标 DNA。 6. 优缺点:巢式 PCR 优点是准确性高,缺点是操作较复杂;普通 PCR 优点是操作简便,缺点是特异性和灵敏度可能稍低。 总之,巢式 PCR 和普通 PCR 各有特点,在实际应用中应根据具体需求选择合适的方法。
2025-02-17 22:12
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回答4
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孟庆福 医师
家庭医生在线合作医院
其他
全科
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你好, 一般应用于动物方面。如:乙肝病毒病毒,梅毒螺旋体,HIV,肿瘤基因等 巢式PCR,可以在10的六次方基因组背景下检测到一个拷贝的病毒基因,也不像二次PCR容易产生成片的产物,是效果最好的PCR,但也因此是最容易污染的PCR
2015-12-23 04:37
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回答3
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刘浩庆 医师
肇庆市大旺开发区医院
一级
全科
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您好!你的问题可以在医院检查到。它的意思是“巢式聚合酶链反应”。希望对你有帮助!
2015-12-22 19:43
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回答2
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肖起涛 主治医师
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内科
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cr是检测病毒和肿瘤的一种检测方法。一般用于动物的检测。这是一种检测病毒和肿瘤的一种方法,这种的检测精确率比较高,但也是最容易发生感染的检测。医生询问:请问你是因为遇到什么问题,来问这个的呢?
2015-12-22 15:16
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回答1
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史东岳
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全科
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你好,如果用普通PCR检测不到条带是因为扩增模板量太低造成的,为了提高检测灵敏度和特异性,可以采用巢式PCR。其优点是:1、克服了单次扩增“平台期效应”的限制,使扩增倍数提高,从而极大的提高了PCR的敏感性;2、由于模板和引物的改变,降低了非特异性反应连续放大进行的可能性,保证了反应的特异性;3、内侧引物扩增的模板是外侧引物扩增的产物,第二阶段反应能否进行,也是对第一阶段反应正确性的鉴定,因引可以保证整个反应的准确性及可行性。但其亦有缺点:进行第二次PCR坟增引起交叉污染的几率大。为了克服此缺点,可彩用同一反应管中巢式PCR,主要利用内外引物Tm值不同。如果你已排除引物,酶,RNA提取,逆转录等等其他原因引起的PCR不成功,确定关键原因是模板量低的话,可以用巢式。但还是建议先排除一下其他可能因素,毕竟普通PCR简单。
2015-12-22 14:04
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