血红蛋白测定法主要有氰化高铁血红蛋白测定法、叠氮高铁血红蛋白测定法、碱羟血红蛋白测定法、酸化血红蛋白测定法和十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法等。 1.氰化高铁血红蛋白测定法：在一定量的血液中加入试剂，使血红蛋白转化为氰化高铁血红蛋白，然后用分光光度计在特定波长下测定吸光度，计算血红蛋白浓度。 2.叠氮高铁血红蛋白测定法：原理与氰化高铁血红蛋白测定法相似，但使用的试剂不同。 3.碱羟血红蛋白测定法：通过碱液使血红蛋白转化为碱羟血红蛋白，进行吸光度测定。 4.酸化血红蛋白测定法：利用酸性溶液处理血液，再测定吸光度。 5.十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法：使用十二烷基硫酸钠使血红蛋白变性，然后测定。 不同的血红蛋白测定法各有特点，在实际应用中，需根据具体情况选择合适的方法，并严格按照操作规范进行，以确保测定结果的准确性。

(1)升高：溶血性贫血(60～650mg/L)、阵发性睡眠性血红蛋白尿症(200～2500mg/L)、阵发性寒冷性血红蛋白尿症、阵发性行军性血红蛋白尿症、黑尿热、冷凝集素病、烧伤、溶血性输血反应(>150mg/L)、体外循环手术后、温性抗体型自身免疫性溶血性贫血、镰状细胞性贫血、地中海贫血等。　　(2)遗传性球形红细胞性贫血的游离血红蛋白浓度正常。

1、氰化高铁血红蛋白法（HiCN）：1966年被ICSH推荐为参考方法。该法操作简单、显色快、结果稳定可靠、读取吸光度后可直接定值等优点。其致命的弱点是氰化钾（KCN）试剂有剧毒，使用管理不当可造成公害。2、十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法（SDS）：该法操作简单、呈色稳定、准确性和精确性符合要求、无公害等优点。但由于摩尔消光系数尚未最后确认，不能直接用吸光度计算Hb浓度，而且SDS试剂本身质量差异较大会影响检测结果。3、叠氮高铁血红蛋白（HiN3）法：该法优点与HiCN测定法相似、最大吸收峰在542nm、显色快、结果稳定、试剂毒性仅为HiCN测定法的1/7，但仍存在公害问题。4、碱羟血红蛋白（AHD575）测定法：该法试剂简单、呈色稳定、无公害、吸收峰在575nm、可用氯化血红素作为标准品。但仪器多采用540nm左右滤光板，限制了此法使用。5、溴代十六烷基三甲胺（CTAB）血红蛋白测定法：该法试剂溶血性强又不破坏白细胞，适用于仪器上自动检测Hb和白细胞。缺点是测定结果的准确度和精密度不佳。

　类过氧化物酶反应法：<40mg/L(<4mg/dl)。血浆游离血红蛋白增高可表明存在血管内溶血,如阵发性寒冷性瓜红蛋白尿,冷凝集素综合征,行军性血红蛋白尿,微血管病性溶血性贫血,溶血性输血反应,体外循环等.地中海性贫血时也可升高.