不孕不育的免疫学检查
免疫不育包括男性抗精子自身免疫不育、女性抗精子同种免疫不育和女性抗透明带免疫不育。
(一)抗精子免疫不育的检查
抗精子免疫包括抗精子体液免疫(抗精子抗体)和抗精子细胞免疫。
(二)抗精子抗体的检测
1,性交后试验 于性交后6~24h内取宫颈粘液,在高倍镜下观察计数精子数。每高倍视野中,有≥21条极度活泼的精子者特异性因素干扰。若血清效价≥1:32,则可认为确含精子抗体。其他尚有毛细管凝集法及平板凝集法,较少用。
2.补体依赖性细胞毒试验及精子制动试验 精子抗体与精子抗原结合,激活补体系统,导致细胞膜通透性及完整性的损害,若为制动抗体,使精干失去活动力,制动值≥2为阳性;若为细胞毒抗体,则用某些染料染色阳性,要求精子活率>70%。微量法仅需样本几微升,对精子活动率较低的样本,可用上游法提取活精子,活率可达90%以上。奉法仅能检测作用于精子尾干的抗体。特异性强,敏感性差,假阴性率较高。
3,被动血凝法 用精子提取物及精浆包被经处理的红细胞使之致敏,将致敏红细胞与待测稀释血清在微量反应板上进行反应,出现红细胞凝集为阳性。此法不受精子活率、计数、精掖中微生物或组织碎片的影响,研究者认为此法特异、敏感,但报道较少,其可靠性及实用性尚待证实。
4.酶联免疫吸附试验(ELISA)及生物素-亲合素酶联免疫吸附法(BA-ELISA) 应用完整精干或精子膜抗原包被固相载体,待测样本中精子抗体与之培养后可结合于抗原表面。随之酶标第二抗体亦可结合其表面,后经加酶底物,根据底物显色情况判断结果。可用肉眼观察,亦可用酶标仪测定,后者客观准确,一般以大于一组阴性血清光密度均值加2倍标准差为阳性。由于完整精子包被易致非特异性吸附.因此若以可溶性精子膜抗原包被,则本法敏感、特异、客观、定量,能确定抗体类型,且易操作。BA-ELISA是在常规ELISA基础上发展起来的新一代定量检测法,其敏感性、特异性超过常规法。
5.免疫珠试验(1mmunbead Test,IBT) 用抗人免疫球蛋白抗体包被的聚丙烯酰胺微球能结合于结合了精子抗体的精子表面,在相差显微镜或电子显微镜下可见到免疫珠随精子运行,若结合一个或多个免疫珠的精子比例≥lo%为阳性。此法可确定抗体的部位、类型及结合精子的比例,能测出活精子表面结合的抗体。
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(责任编辑:果果 )
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