原发性肝癌的基因治疗

这几年肝癌发病率有上升的势头，我国主要是以原发性肝癌为主，原发性肝癌在我国的死亡率极高，目前主要治疗肝癌方法有手术治疗、放疗、化疗以及综合治疗等，然而这些治疗方法效果并不理想。随着分子生物学和免疫学技术的发展，基因治疗技术在肿瘤的治疗中具有广阔的前景。

原发性肝癌的基因治疗：

自杀基因治疗某些病毒、细菌等原核生物含有一类基因，其编码的酶能将原来无毒的药物前体转化为具有细胞毒性的代谢物而杀伤宿主细胞，这类基因称为"自杀基因"。这种特有的转换酶基因-自杀基因导入体内后，利用其产生的酶将无毒或低毒的药物前体转成细胞毒性代谢产物，从而杀死肿瘤细胞。近年来有关此类研究显示出良好的应用前景

。目前常用针对肝癌基因治疗的有单纯病毒Ⅰ型胸苷嘧啶激酶/戊环鸟苷系（HSV？TK/GCV） 和胞嘧啶脱氨酶/5氟胞嘧啶（CD/5Fc）等系统。有研究表明[3]，将"自杀基因"单纯疱疹病毒胸腺嘧啶激酶（Herpes Simplex Virus Thymidine Kinease，HSV？TK）转染肿瘤组织，则该细胞的HSV？TK将前体药Gancyclovir（GCV）转化为对分裂细胞有杀伤作用的代谢产物，特异性杀伤肿瘤细胞，对肝细胞肝癌在体外有一定的疗效。

Won等[4]通过单纯疱疹病毒将AFP反转剪接靶RNA构成酶导入肝癌细胞，取代HCC高效表达AFP的RNA残基，结果明显延缓肿瘤细胞生长并降低了细胞中表达AFP的RNA水平。生物免疫治疗API特异生物免疫疗法主要依靠患者自体免疫细胞进行肿瘤治疗，通过生物技术采集患者外周血中的单个核细胞，在高级别GMP实验室内进行细胞分离、诱导、增殖、激活等，获得具有高度活性、数量、肿瘤杀伤能力的主动免疫细胞、被动免疫细胞以及其它免疫细胞（LAK细胞、CD3AK细胞、CIK细胞、NK细胞、NKT细胞、TIL细胞、DC细胞、巨噬细胞 γδT细胞、TC细胞、T细胞等），根据患者病情需要将上述免疫细胞进行个性化的有机组合后，分多次回输到患者体内，多种免疫细胞有效组合后互相促进、互相影响、取长补短，针对肿瘤靶细胞进行及时的特异性记忆、识别、杀伤。

抑癌基因治疗原发性肝癌的基因治疗，到目前为止发现的抑癌基因有p53，转甲状腺基因及其他抗癌基因和N？ras，C？myc，Cest？2，IGF？ⅡR以及CSF？1等，在所有的抑癌基因中p53基因的突变率较高，它的失活会阻止细胞进入凋亡，从而使之处于持续分裂状态而增加突变及转化的概率。通过恢复或添加肿瘤细胞中失活或缺乏的抑癌基因，恢复抑癌基因的功能，从而抑制肿瘤的生长和转移，常用野生型p53、p16 等。p53基因的突变或者失活不仅使细胞本身周期失调具有致瘤性，并且可以影响细胞对其他凋亡信号如TGF的感受性下降。

穆红等[7]使用p53？cDNA的真核表达质粒p53？pcDNA3对人源性肝癌细胞系HepG2进行转染，采用RNA原位杂交的方法证明了外源p53？cDNA在HepG2？p53细胞中的转染和转录，成功导入的p53？cDNA可诱导HepG2细胞发生凋亡。p16基因也为抑癌基因，原发性肝癌中p16基因也常表现失活，p16基因能阻抑细胞生长于G1？S期，但不诱发凋亡。

p16启动子甲基化后，肝癌发生概率明显提高，尤其对于HBV感染者。抗血管生成基因治疗肿瘤血管生成是肿瘤生长转移的关键步骤，是促血管生成因子和抑制因子作用失衡的结果。肿瘤血管生成是由肿瘤细胞和肿瘤浸润炎症细胞，如巨噬细胞或肥大细胞产生的促血管形成因子所介导的。恶性肿瘤的生长和转移依赖于新生血管的形成，为了不断地获得氧和养料，肿瘤细胞就要不断的分泌促血管形成因子，不少细胞因子与肿瘤血管形成密切相关，因此，抑制肿瘤血管形成可以导致肝癌细胞衰退。肿瘤血管生成中最主要的是血管内皮细胞生长因子（VEGF）。