垂体性闭经的诊断需要综合多种因素，包括病史、症状、体征、实验室检查及影像学检查等。健康问题不容忽视，身体稍有不适即应就医，听从医生的专业建议进行治疗。
1.病史询问：了解患者的月经史、生育史、服药史、手术史等。
2.症状观察：有无泌乳、头痛、视力障碍等。
3.体格检查：检查第二性征发育情况，包括乳房、阴毛、腋毛等。
4.激素测定：测定促性腺激素（FSH、LH）、泌乳素（PRL）等水平。
5.影像学检查：如头颅磁共振成像（MRI），观察垂体有无病变。
6.其他检查：必要时进行甲状腺功能、肾上腺功能等检查，以排除其他内分泌疾病。
综合以上各项检查结果，结合临床表现，可对垂体性闭经作出准确诊断。

测定卵巢功能的方法有：基础体温、子宫颈粘液检查、阴道脱落细胞涂片，测定血、尿中雌激素和孕激素水平等。通过卵巢功能的测定可以鉴别闭经的原因是在靶器官或在卵巢或卵巢以上的某个环节。

垂体性闭经的诊断：
1、阴道脱落细胞检查：是较常用的了解雌激素水平的方法。用棉棍浸生理盐水后取阴道上段侧壁的脱落细胞，涂在玻片上，固定和染色后，观察表、中、底各层细胞的百分比。表层细胞所占百分比越高，反映雌激素水平越高。
2、宫颈黏液：如发现闭经患者宫颈黏液为透明的、拉力好的稀薄黏液，涂在玻璃片上干燥后在显微镜下可见羊齿状结晶，表明该患者卵巢有分泌雌激素的功能。
3、基础体温测定：可间接了解排卵功能。排卵后的黄体分泌孕酮，孕酮有升高体温的作用。正常月经周期中卵泡期体温比较平稳，一般波动在36.5℃以下。排卵后体温上升O.
3～0.5℃，维持12～16天，在月经前1天或月经来潮当天下降至卵泡期水平。这种前半周期低而后半周期升高的基础体温称双相体温，一般提示有排卵或黄体形成。无此变化的体温称单相体温，表示无排卵。闭经患者基础体温多为单相，但子宫性闭经因其卵巢功能是正常的，因此可表现有双相基础体温。
4、其他检查：盆腔B超可协助诊断是否有先天性子宫缺如或畸形。
鞍区的影像学检查可诊断是否有垂体瘤。诊断性刮宫，子宫碘油造影及内镜检查可了解宫腔及内膜情况。此外若需除外其他内分泌异常或发育畸形时，还应检查其他有关腺体如甲状腺、肾上腺等的激素水平，生化，病理生理检查及染色体检查等。